油镜的放大倍数较高，而透镜很小，光线通过不同密度的介质物体（玻片→空气→透镜）时，部分光线会发生折射而散失，进入镜筒的光线少，视野较暗，物体观察不清。

油镜的使用方法：

（1）在使用油镜之前，必须先经低、高倍镜观察，然后将观测目标部分移到视野的中心。

（2）将集光器上升到最高位置，光圈开到最大。

（3）转动物镜转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油镜，在转换油镜时，奥秋显微镜网提示：从侧面水平注视镜头与玻片的距离，使镜头浸入油中而又不以压破载玻片。

（4）用左眼观察目镜，并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。

（5）油镜使用完毕，先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去，然后再用干擦镜纸擦干净。