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提取DNA时除去蛋白质的方法有哪些

作者:李阳
2019-12-14
百科

1.在提取缓冲液中加入10%CTAB。CTAB(十六烷基三乙基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜,它能与核酸形成复合物,在高盐溶液中(0.7 mol/L NaCl)是可溶的,当降低溶液盐浓度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)时,从溶液中沉淀,通过离心就可将DNA与蛋白分开。

2.在使用蛋白酶K的基础上在使用20%的SDS。SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构,进而除去蛋白质。

3.使用氯仿/异戊醇抽提两次。两次的效果要明显好于一次的,从而尽可能多的除去蛋白质。

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