1.我用0.2M的磷酸盐作为流动相,用完后用5%的乙腈冲洗,为什么会堵

柱子与泵都是高精密分析部件，磷酸盐无论在甲醇或乙腈中，它地溶解度都很小，在甲醇或乙腈溶液中，由于磷酸盐的溶解度很小，因此在磷酸盐流动的体系中，当直接用甲醇或乙腈流动冲洗时，就会有磷酸盐晶体析出，就如在流动相中加入了砂子，所以就会发生堵柱堵泵现象。

正确的冲洗方法是先用5%左右的硫酸水溶液冲洗一段时间，再用纯水冲洗一段时间，再用不同比例水—甲醇溶液冲洗，再用纯甲醇冲洗，之后再转为其它的有机流动相，整个过程要两个小时以上。在含盐流动相转为有机试剂流动相时，这些环节是不可以省略的，严重的时候，整个系统都有可能报废。

2.c18柱堵了怎么办

你怎么保存的？

用的时候不能用酸性碱性过强的流动相，用完后一定要用有机相和水相梯度冲洗几遍（可能的话直接冲过夜），尤其是你用的流动相有酸、碱、缓冲液、盐等东西的时候一定要换成蒸馏水好好冲洗。

另外最后保存的时候一定要把柱子里灌满有机溶解（甲醇或乙腈），冲至平衡，一定不能留水在里面（尤其是酸性的水液）。

20个柱体积不够，你是不是用酸碱盐了？你最好用甲醇（乙腈）-水 梯度100%-10% （每次梯度至少20min）反复洗涤，另外用乙腈保存比甲醇好。