1.普通光学显微镜如何使用

显微镜是一种精密的光学仪器，已有300多年的发展史.自从有了显微镜，人们看到了过去看不到的许多微小生物和构成生物的基本单元——细胞.目前，不仅有能放大千余倍的光学显微镜，而且有放大几十万倍的电子显微镜，使我们对生物体的生命活动规律有了更进一步的认识.在普通中学生物教学大纲中规定的实验中，大部分要通过显微镜来完成，因此，显微镜性能的好坏是做好观察实验的关键. 一、显微镜的光学系统 显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜、反光镜和聚光器四个部件.广义的说也包括照明光源、滤光器、盖玻片和载玻片等. （一）、物镜 物镜是决定显微镜性能的最重要部件，安装在物镜转换器上，接近被观察的物体，故叫做物镜或接物镜. 1、物镜的分类 物镜根据使用条件的不同可分为干燥物镜和浸液物镜；其中浸液物镜又可分为水浸物镜和油浸物镜（常用放大倍数为90—100倍）. 根据放大倍数的不同可分为 低倍物镜（10倍以下）、中倍物镜（20倍左右）高倍物镜（40—65倍）. 根据像差矫正情况，分为消色差物镜（常用，能矫正光谱中两种色光的色差的物镜）和复色差物镜（能矫正光谱中三种色光的色差的物镜，价格贵，使用少）. 2、物镜的主要参数： 物镜主要参数包括：放大倍数、数值孔径和工作距离. ①、放大倍数是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值.它指的是长度的比值而不是面积的比值.例：放大倍数为100*，指的是长度是1μm的标本，放大后像的长度是100μm，要是以面积计算，则放大了10,000倍. 显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积. ②、数值孔径也叫镜口率，简写NA 或A，是物镜和聚光器的主要参数，与显微镜的分辨力成正比.干燥物镜的数值孔径为0.05-0.95，油浸物镜（香柏油）的数值孔径为1.25. ③、工作距离是指当所观察的标本最清楚时物镜的前端透镜下面到标本的盖玻片上面的距离.物镜的工作距离与物镜的焦距有关，物镜的焦距越长，放大倍数越低，其工作距离越长.例：10倍物镜上标有10/0.25和160/0.17，其中10为物镜的放大倍数；0.25为数值孔径；160为镜筒长度（单位mm）;0.17为盖玻片的标准厚度（单位 mm）.10倍物镜有效工作距离为6.5mm,40倍物镜有效工作距离为0.48mm . 3、物镜的作用是将标本作第一次放大，它是决定显微镜性能的最重要的部件——分辨力的高低. 分辨力也叫分辨率或分辨本领.分辨力的大小是用分辨距离（所能分辨开的两个物点间的最小距离）的数值来表示的.在明视距离（25cm）之处，正常人眼所能看清相距0.073mm的两个物点，这个0.073mm的数值，即为正常人眼的分辨距离.显微镜的分辨距离越小，即表示它的分辨力越高，也就是表示它的性能越好. 显微镜的分辨力的大小由物镜的分辨力来决定的，而物镜的分辨力又是由它的数值孔径和照明光线的波长决定的. 当用普通的中央照明法（使光线均匀地透过标本的明视照明法）时，显微镜的分辨距离为d=0.61λ/NA 式中d——物镜的分辨距离，单位 nm. λ——照明光线波长，单位 nm. NA ——物镜的数值孔径 例如油浸物镜的数值孔径为1.25，可见光波长范围为400—700nm ，取其平均波长550 nm，则d=270 nm，约等于照明光线波长一半.一般地，用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm. （二）、目镜 因为它靠近观察者的眼睛，因此也叫接目镜.安装在镜筒的上端. 1、目镜的结构 通常目镜由上下两组透镜组成，上面的透镜叫做接目透镜，下面的透镜叫做会聚透镜或场镜.上下透镜之间或场镜下面装有一个光阑（它的大小决定了视场的大小），因为标本正好在光阑面上成像，可在这个光阑上粘一小段毛发作为指针，用来指示某个特点的目标.也可在其上面放置目镜测微尺，用来测量所观察标本的大小. 目镜的长度越短，放大倍数越大（因目镜的放大倍数与目镜的焦距成反比）. 2、目镜的作用 是将已被物镜放大的，分辨清晰的实像进一步放大，达到人眼能容易分辨清楚的程度. 常用目镜的放大倍数为5—16倍. 3、目镜与物镜的关系 物镜已经分辨清楚的细微结构，假如没有经过目镜的再放大，达不到人眼所能分辨的大小，那就看不清楚；但物镜所不能分辨的细微结构，虽然经过高倍目镜的再放大，也还是看不清楚，所以目镜只能起放大作用，不会提高显微镜的分辨率.有时虽然物镜能分辨开两个靠得很近的物点，但由于这两个物点的像的距离小于眼睛的分辨距离，还是无法看清.所以，目镜和物镜即相互联系，又彼此制约. （三）、聚光器 聚光器也叫集光器.位于标本下方的聚光器支架上.它主要由聚光镜和可变光阑组成.其中，聚光镜可分为明视场聚光镜（普通显微镜配置）和暗视场聚光镜. 1、光镜的主要参数 数值孔径（NA ）是聚光镜的主要参数，最大数值孔径一般是1.2—1.4，数值孔径有一定的可变范围，通常刻在上方透镜边框上的数字是代表最大的数值孔径，通过调节下部可变光阑的开放程度，可得到此数字以下的各种不同的数值孔径，以适应不同物镜的需要.有的聚光镜由几组透镜组成，最上面的一组透镜可以卸掉或移出光路，使聚光镜的数值孔径变小，以适应低倍物镜观察时的照明. 2、聚光镜的作用 聚光镜的作用相当于凸。

2.光学瞄准镜怎么用

刚回答了一个朋友的提问，顺便复制过来让朋友参考，以tasco 2-6x32瞄准镜为例

【内容如下】

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tasco是一个瞄准镜的牌子

2-6x32的意思，2-6是指放大倍率是2倍到6倍可调倍率，32是物镜直径为32mm

aoe 这个到现在也没弄明白怎么来的，可能是红光照亮十字线，或者绿光照亮十字线或者红绿双光，至今这种后标我也不知道怎么来的这缩写，有明白的朋友可以指点一二

使用方法

【1】 倍率调整，变倍瞄具在目镜的镜筒上标有刻度，拿2-6倍来说，通常会标有2、3、4、5、6 这些倍率的定位点，可以旋转目镜上的三角图形定位刻度对准相应数字刻度即可，但不同距离上的物体在一些倍率上会视物模糊，所以并不是非得将三角定位刻度准确标定在数字上，只要视物清晰即可。

【2】 调节旋钮，位于正上方的是距离补偿旋钮，位于右侧的是风偏旋钮。

上方的旋钮有一箭头标有“up”，也就是顺着箭头方向旋转弹着点会向上移动，比如5发射击，弹着点均在十字中心下方，你可以朝“up”方向旋转，不断调整这样再次射击弹着点会渐渐与十字线中心水平线重合。

右侧旋钮有一箭头标有“L”这个就是顺着箭头方向旋转，弹着点会向左修正，同样比如五发一组射击，弹着点偏十字线中心右侧，可以向“L”方向旋转，这样弹着点会渐渐向十字线垂直线方向靠拢。

同样贴出一个链接，有助于朋友理解（最好复制链接到浏览器地址栏打开，直接点击可能有误）

3.油镜的使用方法

a.将光线调至最强程度（聚光器提高，光圈全部开放）。

b.转动粗调节器使镜筒上升，滴香柏油1小滴（不要过多，不要涂开）于接物镜正下方标本上。

c.转动接物镜转换盘，使油镜头于镜筒下方。

d.俯身镜旁侧面在肉眼的观察下，转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内，轻轻接触玻片为止。

e.慢慢转动粗调节器，使油镜头徐徐上升至见到标本的物象为止。

f.转动微调节器，使视野物象达到最清晰的程度。

g.左手徐徐移动推进器，并转动微调节器以观察标本。

h.标本观察完毕后，转动粗调节器将镜筒升起，取下标本玻片。立即用擦镜纸将镜头上的香柏油擦净。

4.什么是偏光镜

简介 偏光镜是根据光线的偏振原理制造.我们知道，当阳光投射在路面或水面上时，直接刺激眼睛，使眼睛感到眩目、疲劳、不能持久视物.特别是当您在驾驶汽车、进行户外娱乐活动时，不仅影响我们的工作和娱乐情绪，甚至影响我们对物象的判断力而造成危险；长期经受阳光的直接照射，还会导致视力的急速下降，形成近视、远视、散光或白内障等. 偏光镜片测试 偏光镜的特效就是有效地排除和滤除光束中的散射光线.使光线能于正轨之透光轴投入眼睛视觉影像，使视野清晰自然.有如百叶窗帘的原理，光线被调整成同向光而进入室内，自然使景物看起来柔和而不刺眼. 偏光镜大多数出现在太阳眼镜的应用上，是有车一族与钓鱼爱好者的必需装备，它能帮助开车族滤掉迎面的远光灯，能使钓鱼爱好者看清水面上的鱼漂.过去，偏光镜一直是国际大牌的太阳镜才有的，而目前国内也有很多正规偏光镜品牌. 编辑本段分类 根据过滤偏振光的机理不同，偏光镜可以分为圆偏光镜（简称CPL）和线性偏光镜（简称LPL）两种，这两种的作用是相同的.LPL主要用于老式的手动对焦相机.出现较晚的CPL增加了一层1/4波长的薄膜，这种薄膜有一种特殊的性质，可以对一个方向（假设为x）的偏振电矢量产生π/2相移，而对与它垂直方向（假设为y）的电矢量没有任何作用.所以可以使上述偏振光沿x和y的角平分线方向通过1/4波片，于是出射光线就是一束有两种偏振方向垂直，相位差π/2的偏振光合成的光线了，也就是所谓的圆偏振光.这种设计使得其更适合新式的自动对焦和自动曝光相机.目前采用AF镜头（自动调焦功能的交换式照相机镜头）的相机，都采用CPL作为偏光镜.在一些光线条件下，线性偏光镜有可能误导机内测光元件进行测光，因此DC和大多数自动对焦相机都使用圆偏光镜. PL镜的作用是过滤反射光线，增加成像反差.其工作原理是选择性地过滤来自某个方向的光线.通过过滤掉漫反射中的许多偏振光，从而减弱天空中光线的强度，把天空压暗，并增加蓝天和白云之间的反差.具体实拍时要看着取景器并旋转前镜，取景器中天空最暗时的效果最明显，最暗与最亮相差90度.你可根据需要转到最暗与最亮间的任意角度. PL镜也可以有效减弱或者消除非金属表面的反光，这种反射光是典型的偏振光（金属表面反射回的光线不是偏振光，偏光镜对其不起作用），通过调整偏光镜就可以滤掉这一部分的反光，从而改善被摄物体的画质，并提高画面的清晰度.例如，通过使用偏光镜，可以减弱水面的反光，从而清晰的拍摄到水中的鱼.在拍摄这样的场景时，光源的投射角度与相机拍照的角度要趋近一致，并且其最大的偏折角度需介于30~40度之间.使用的时候可以通过慢慢转动滤镜前组的镜片来进行调整，力求把景物表面的反光降到最低程度. 偏光镜 另外，偏光镜可以有效提高色彩的饱和度，提高反差，这是因为偏光镜可以吸收大气中雾气或灰尘反射出的各种方向的杂光，从而使拍摄出的影像更加纯净.例如，在拍摄花卉静物等摄影中，经常使用偏光镜去拍色彩艳丽的照片.在风景摄影、花卉摄影和拍摄某些特定的反光比较强烈的景物时很有用处.偏光镜运用在拍摄风景照时，对云层的描绘有极好的效果.蓝色天空的光线折射率比被白云散射后的光线来得大.利用偏光镜也可以使绿叶的颜色更饱和及消除低角度拍摄城市景物的翳雾. 偏振镜由镜片主体和一个与它相连并可旋转的后座框两部分组成，镜片主体由极细的水晶玻璃组成光栅.旋转时，偏振镜的光栅将那些不与它平行的偏振光线阻挡.因此，偏振镜能够控制和选择记录与它平行的反射光（此反射光为偏振光）数量.这就是偏振镜能够消除或减弱非金属表面反光的道理.但大多数偏振镜有一点偏蓝色.同时在用与拍摄时也会阻挡与偏振光振动方向相同的部分非偏振光.为避免画面色彩过于平淡，一般要增加一档以上的曝光量. 编辑本段特点 偏光镜片虽然能滤除诸多不规则光干扰，避免眩目、刺目等现象的发生，但若镜片本身的弧弯不能呈光学标准屈光状态，则偏光效果削弱，影响影像真实性，且耐用性差. 市面上一般的偏光太阳镜是用纤维夹合偏光膜制造而成的.它不同于光学玻璃偏光太阳镜，因其质地柔软，弧弯不稳定，镜片装配上框以后，镜片难以达到光学屈光标准，视像松散、变形.由于弧弯不稳定，致使镜片变形，就直接导致其透光结像清晰度差，影像失真，不能起到正常视光效果.且表面易刮伤、磨损.不耐用. 编辑本段注意事项 1.偏光镜有线性偏光镜（线偏）及环形偏光镜（圆偏）两种，使用方法及获得效果一样；但圆偏可以使光线通过滤镜后呈环形走向而不是线形，特别适合于具有自动对焦系统的相机. 使用单镜反光机时，因为相机内使用了一片反光镜片，环形偏光镜可以确保对焦的准确性. 较便宜的线偏在使用过程中可能会影响某些相机的自动对焦，因此如果在数码相机上使用偏光镜的话，需要使用圆偏. 2. 偏光镜一般较厚，最好不要配合其它滤镜一起使用，不然很容易会在画面中形成黑角. 3. 偏光镜本身会吸收约 75% 的光线，如果在阴天使用，或者使用小光圈快摄时，最好以三脚架稳定机身.由于数码相机使用 TTL 测光，因此不需要因为入光量。

5.光学显微镜的使用步骤

（一）正置显微镜1、安放 右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立。

桌面要清洁、平稳，要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧，距离桌边3~4厘米处。

2、清洁 检查显微镜是否有毛病，是否清洁，镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭，如有胶或粘污，可用少量二甲苯清洁之。

3、对光 镜筒升至距载物台1~2厘米处，低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜，光线强时用平面镜，光线弱时用凹面镜，反光镜要用双手转动。

若使用的为带有光源的显微镜，可省去次步骤，但需要调节光亮度的旋钮。4、安装标本 将玻片放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上。

用弹簧夹将玻片固定，转动平台移动器的旋钮，使要观察的材料对准通光孔中央。5、调焦 调焦时，先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒，并从侧面仔细观察，直到物镜贴近玻片标本，然后左眼自目镜观察，左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本物像时停止，再用细调焦旋钮回调清晰。

操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时，应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值。若使用双筒显微镜，如观察者双眼视度有差异，可靠视度调节圈调节。

另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距。6、观察 若使用单筒显微镜，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。

右手记录、绘图。镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

光强的调节：一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外，虹彩光圈的调节也十分重要。

（1）低倍镜观察 观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。（2）高倍镜观察 从低倍镜转至高倍时，只需略微调动细调焦旋钮，即可使物像清晰。

使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮，否则易压碎盖玻片并损伤镜头。转动物镜转换器时，不可用手指直接推转物镜，这样容易使物镜的光轴发生偏斜，转换器螺纹受力不均匀而破坏，最后导致转换器就会报废。

（3）油镜的观察 先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。油镜观察前，应将显微镜亮度调整至最亮，光圈完全打开。

使用油镜时，先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后降低镜筒并从侧面仔细观察，直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本，然后用目镜观察，并用细调焦旋钮抬升镜筒，直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。香柏油滴加要适量。

油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。7、结束操作 观察完毕，移去样品，扭转转换器，使镜头V字型偏于两旁，反光镜要竖立，降下镜筒，擦抹干净，并套上镜套。

若使用的是带有光源的显微镜，需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗，再关闭电源按钮，以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯。 （二）倒置显微镜 倒置显微镜与正置显微镜的主要区别在于物镜位于载物台下方，这样有利于观察时在上方对样品进行一些实时操作。

倒置显微镜操作过程基本与双筒的正置显微镜相似，需注意以下几点：观察时可调节铰链式双目目镜至舒适的位置。组织培养液或水溅到载物台上、物镜上或显微镜镜架上可能会损伤设备。

如果溅上后，应该立即从墙上插座拔下电源线，擦去溅出液或水。一定要轻柔转动光强调节钮，不要试图将旋钮转过终点位置。

使用后一定要先将灯的强度调至最小再关电源。使用后要旋转三孔转换器，使物镜镜片置于载物台下侧，防止灰尘的沉降。

（三）实体显微镜 又称体视显微镜或解剖显微镜。操作步骤基本和双筒正置显微镜类似：取用解剖镜时，移动需用双手，保持稳重。

若需连镜箱搬动，应将镜箱锁好，同时镜箱的钥匙必须拔除。镜管上若有防尘罩，应取下并换上目镜及眼罩。

将样品置于玻片上或蜡盘中再放到载物盘上待观察。拧开锁紧螺丝，把镜体先上升到一定高度，然后锁紧镜体。

观察前可先转动目镜管以适合眼间距。双眼视度差异可用视觉圈调节。

对焦时，转动升降螺丝不能太快或强行扭转，谨防损坏齿轮。如需放大观察，再转动倍率盘直到所需放大倍率。

物像越大，光线越暗，必须调好光源选择好背景物。 用毕后，先将载物盘上的东西拿走，松开锁紧螺丝将镜体放下并锁紧。

取出目镜并换上防尘罩。将元件全部放回，注意不要与其它镜互换。

用布把镜身擦干净，放入镜箱内，锁紧镜箱。